本文采用小鼠氨水引咳法,小鼠气管酚红排泌法分别研究款冬花醇提取物,石油醚提取物,氯仿提取物,乙酸乙酯提取物,正丁醇提取物,水残余物高,低剂量的镇咳祛痰作用。
方法:
1、氨水诱咳模型及止咳活性研究:取小鼠逐个放于玻璃钟罩内,以25%氨水喷雾引咳15s,观察小鼠从喷雾开始到出现咳嗽的时间,1.5min内不出现咳嗽者放弃.挑选敏感小鼠只,随机分成14组,即空白组,阳性药物(咳特灵胶囊)对照组,乙醇,石油醚,氯仿,乙酸乙酯,正丁醇,水部位高,低剂量组,每组10只,实验前小鼠禁食不禁水,按0.01ml/g体重每天灌胃(ig)给药1次,连续7天,其中空白组给等体积蒸馏水,末次给药1h后,25%浓氨水恒压定量喷雾,5s后立即取出,记录小鼠从接受喷雾开始到出现咳嗽的潜伏期及2min内咳嗽的次数.
2、小鼠气管酚红排泌量观察准确称取:2.5mg的酚红,加5%碳酸氢钠溶液25ml溶解,依次稀释配制酚红浓度为0.1,0.3,0.5,0.7,1.0,3.0,5.0,7.0,10.0μg/ml的溶液,于nm处分光光度计分别测吸光度,以酚红浓度为横坐标(X),吸光度(Y)为纵坐标做标准曲线,得回归方程:Y=0.X-0.(R的平方=0.)。取小鼠只,随机分为14组,分组给药。末次给药0.5h后,各小鼠按剂量0.1ml/10g体重腹腔注射5%(5g/ml)的酚红生理盐水溶液,注射后0.5h于手术板上将小鼠颈椎脱臼处死,剪开颈前皮肤,剥离气管周围组织,剪下从甲状软骨下至气管分支处的一段气管,放入盛有2ml生理盐水的试管中,加入1mol/LNaOH溶液0.1ml,紫外可见分光光度计nm波长处测定OD值,记录各组结果,并根据实验前制定的标准曲线计算出气管冲洗液中酚红浓度。
结果:
1、款冬花提取物对氨水致小鼠咳嗽的影响:
款冬花提取物对浓氨水致小鼠咳嗽实验结果(表1)表明,以正丁醇高剂量组,氯仿高剂量组减少咳嗽次数和延长咳嗽潜伏期效果较好。
2、祛痰效果:
在小鼠祛痰实验中,酚红排泌量的多少以紫外吸光度的大小表示,吸光度大说明小鼠酚红排泌量多。实验结果(表2)表明,氯仿高剂量组小鼠气管酚红排泌量最多,祛痰效果最好。
结论:
本文研究结果表明与空白对照相比,款冬花正丁醇高剂量,氯仿高剂量组能显著减少小鼠咳嗽次数,延长咳嗽潜伏期。祛痰效果以氯仿高剂量组最好,与阳性对照相比差异有统计学意义,但与空白对照相比差异无统计学意义。款冬花的镇咳部位是正丁醇部位,氯仿部位,祛痰部位可能是氯仿部位。
参考文献:贺润丽,王晓英,韩毅丽,尚彩玲,苗得雨.款冬花不同部位提取物镇咳祛痰作用研究[J].时珍国医国药,,27(01):77-79.
文献整理:董现龙
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